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      涼血顆粒質量

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      涼血顆粒質量

      【摘要】目的制定成品的質量控制標準。方法采用薄層鑒別鑒定赤芍、甘草,高效液相色譜法測定制劑中芍藥苷的含量。高效液相色譜條件:Hypersil柱(4.6nm×250nm,10μm);流動相:甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-醋酸-異丙醇(67:173:4:4);流速:1ml/min;檢測波長:230nm。結果薄層色譜鑒別專屬性好,高效液相法測定制劑中芍藥苷的含量方法重現性好,準確可靠。結論可用作為控制制劑質量的標準。

      【關鍵詞】涼血顆粒;高效液相色譜;薄層色譜

      涼血顆粒是由赤芍、甘草組成的中藥制劑,具有清熱涼血、散瘀止痛。該方組方簡單,療效確切,為了有效控制制劑的質量,對制劑建立質量標準。

      1儀器與試藥

      1.1儀器Agilent1100,VWD檢測器,雙槽玻璃展開槽。

      1.2試劑甲醇:色譜純,美國天地(TEDIA)公司,其他試劑為分析純。

      2鑒別項

      取本品3粒內容物,加醋酸乙脂20ml,超聲10min,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作供試品溶液。另取甘草對照藥材1g,缺甘草陰性樣品適量,同法制成對照藥材溶液、陰性對照液。吸取上述三種溶液各5μl,點于同一塊硅膠G薄層板上,以氯仿-甲醇(7.5:4:1)為展開劑,展開取出,晾干,噴以2%硫酸香草醛溶液(1:1),置105℃烘至斑點清晰,在供試品色譜中,在與對照藥材和對照品相應的位置上,顯相同顏色的斑點。

      3含量測定

      3.1實驗條件芍藥苷對照品(中國生物制品檢驗所),色譜條件:色譜柱:依利特hypersilC18(4.6nm×250nm,10μm);流動相:甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-醋酸-異丙醇(67:173:4:4);流速:1ml/min;檢測波長:230nm。

      3.2測定方法對照品溶液的制備:精密稱取已干燥的芍藥苷對照品適量,置棕色瓶中,加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液,即得。

      供試品溶液的制備:取本品內容物0.4g,精密稱定,精密加入甲醇50ml,超聲15min,稱定重量,用甲醇補足減失的重量,濾過,棄去初濾液,取續濾液作為供試品溶液,即得。

      測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀。

      3.3方法學考查

      3.3.1樣品的分離度吸取蘆丁對照品溶液、赤芍藥材溶液、陰性對照溶液、供試品溶液按上述方法測定,見圖1~4。

      圖1芍藥苷對照品HPLC圖

      圖3陰性對照HPLC圖圖2赤芍HPLC圖

      圖4供試品HPLC圖

      3.3.2標準曲線對照品溶液(0.311mg/ml)進樣量分別為5、8、10、15μl,按試驗方法項下的色譜條件測定。以量(μg)為橫坐標,色譜峰的面積為縱坐標,繪制標準曲線,結果表明,芍藥苷在1.55~4.67μg的范圍內,其進樣量與色譜峰面積呈良好的線性關系。回歸方程:Y=388.1X-6144,相關系數r=0.9995。

      3.3.3穩定性試驗取樣品按含量測定項下的色譜條件測定其峰面積,每隔1h測1次,連續測6次,測定結果RSD=1.7%,樣品在5h內測定是穩定的。

      3.3.4精密度試驗取對照品溶液,分別等量進樣6次,按上述實驗方法項下的色譜條件測定,結果表明其RSD=0.77%。

      3.3.5重現性試驗取樣品分別為5份,按含量測定項下的方法分別測定,其RSD=1.3%,樣品測定有良好的重現性。

      3.3.6回收率試驗取已測定含量的供試品約0.2g,精密稱定,精密加入3.8750mg/ml芍藥苷對照品2ml,按上述供試品溶液的制備方法制備和測定,一式5份,結果表1。

      本方法測定的平均回收率為97.8%,基本符合要求。

      4討論

      赤芍的薄層鑒別,陰性對照無干擾,可作鑒別項用。甘草鑒別,已往鑒定甘草中的甘草酸銨和甘草次酸,因樣品色譜干擾較大,故只用甘草藥材作對照。芍藥苷的含量測定方法,文獻報道較多[1~3],經過對比實驗,采用流動相為甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-醋酸-異丙醇(67:173:4:4),對樣品峰的分離效果最好。表1加樣回收試驗結果

      【參考文獻】

      1國家藥典委員會.中國藥典.北京:化學工業出版社,2000,78;125.

      2董春芬,劉天福.HPLC法測定冠心顆粒中芍藥苷的含量.中華實用中西醫雜志,2003,3(16):840-841.

      3郝明虹,曾紅.健脾消食顆粒中芍藥苷的定量研究.中國實驗方劑學,2000,6(2):19-20.

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