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      白花蛇舌草質量

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      白花蛇舌草質量

      【關鍵詞】白花蛇舌草

      【摘要】目的建立白花蛇舌草質量控制方法。方法采用生藥學方法對白花蛇舌草及其偽品水線草和纖花耳草進行鑒別,并建立了白花蛇舌草中齊墩果酸的薄層掃描含量測定方法。結果白花蛇舌草中的齊墩果酸在0.8~6.4μg間有良好的線性關系,回收率為98.7%,RSD為1.95%(n=5)。結論將生藥學研究方法和白花蛇舌草中的齊墩果酸的含量測定方法相結合,可作為質量控制方法。

      關鍵詞白花蛇舌草水線草纖花耳草齊墩果酸鑒別

      【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodofqualitycontrolofOldenlandiaDiffusa(willd.)Roxb.MethodsThecontentofoleanolicacidinOldenlandiaDiffusa(willd.)RoxbwasdeterminedbyTLC-scanningtodiscriminateitscounterfeitsuchasOldenlandiacorymbosaL.andHedyotistenellifloraBL.ResultsTherelationshipbetweenOldenlandiaDiffusa(willd.)Roxbanditsoleanolicacidcontentduring0.8and6.4μgwasverylinearwhentherecoveryrateofaddingsamplewas98.7%,theRSD=1.95%(n=5).ConclusionCombinationofpharmacog-nosyresearchingmethodandquantitativedeterminationofOleanolicacidcanbeusedforthequalitycontrolofOlden-landiaDiffusa(willd.)Roxb.

      KeywordsOldenlandiaDiffusa(willd.)RoxbOldenlandiacorymbosaL.Hedyotistenellifolraoleano-licaciddiscrimination

      白花蛇舌草為茜草科植物白花蛇舌草[OldenlandiaDif-fusa(Willd)Roxb]的干燥全草,為常用中藥,具有清熱解毒、利尿消腫、活血止痛之功效,廣泛分布于亞熱帶地區。近年來由于臨床上應用廣泛,商品供不應求,導致白花蛇舌草異常混亂。常見的混偽品有水線草[(茜草科)Hedyotiscorym-bosa(L)Lam的全草]和纖花耳草[(茜草科)HedyotistenelifloraB1.的全草]。為保證臨床用藥安全有效,我們對白花蛇舌草進行生藥研究,并將常見的混偽品進行鑒別,同時,還建立了白花蛇舌草中齊墩果酸的薄層掃描含量測定方法。現將研究結果報告如下。

      1儀器與試藥

      薄層掃描儀(日本島津CS-930型);硅膠G預制板(德國Merck公司)定量毛細管(美國Drummand公司生產);齊墩果酸對照品(中國藥品生物制品定所);白花蛇舌草、水線草和纖花耳草均采自藥圃并經鑒定。所用試劑均為分析純。

      2生物學研究

      2.1植物形態白花蛇舌草為一年生披散小草本,莖扁圓柱形,從基部分枝。單葉對生、膜質、線形,長1~3cm,寬1~3mm,頂端急尖,側脈不明顯,無柄,托葉合生,長1~2mm,上部芒尖,花四數,單生或成對生于葉腋,花梗長0.1~1.5cm,萼管與子房合生,球形,略扁、宿存;花冠白色,筒狀,長3.5~4mm,裂片卵狀矩圓形;雄蕊生于花冠筒喉部,花藥2室;雄蕊1。蒴果扁球形,直徑2~3mm,灰褐色。水線草的花2~5朵集成腋生傘房花序,花梗極纖細,長0.5~1cm;托葉合生成鞘狀,頂端近截形,有剛毛。纖花耳草的葉革質,花無柄,1~3朵生于葉腋內,而植株干后黑色。

      2.2藥材性狀白花蛇舌草全體扭曲成團狀,灰綠色或灰棕色,有主根一條,須根纖細。莖細而卷,多分枝,扁圓柱形,質脆易折斷,中央有白色髓部。葉對生,條形,長1~3cm,多破碎脫落。蒴果扁球形,腋生,同含多數極細小種子。氣微,味淡。水線草的莖四棱形,多中空,葉為條形或條狀披針形,蒴果2~5個腋生,具長梗。纖花耳草的葉革質,反卷,蒴果卵形,腋生,幾無梗,味淡有燒舌感。

      2.3顯微特征白花蛇舌草:(1)表皮細胞一列,類方形或卵圓形,常見單個細胞向外強烈突起,外被角質層。(2)皮層較窄,細胞一般比表皮細胞小,含少量小油滴,個別細胞中含草酸鈣針晶束;內皮層細胞一列,切向扁長。(3)韌皮部狹窄,約2~5列細胞。(4)木質部呈環,導管常2~6個徑向單列,木纖維壁厚,木化;射線細胞一列。(5)髓部寬闊,細胞較大,可見草酸鈣針晶。

      3白花蛇舌草中齊墩果酸的含量測定

      3.1溶液備制

      3.1.1對照品溶液精密稱取齊墩果酸對照品8.0mg于5ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,即得。

      3.1.2藥材供試液取過40目篩的干燥的白花蛇舌草藥材粉末0.2g,精密稱定,加硫酸-乙醇(1∶9)50ml,回流3h,待冷卻后,加氯仿50ml,再回流2h,冷卻,過濾。藥渣用20ml氯仿洗滌,洗滌液與濾液合并。分取氯仿層、水層,分別用10ml氯仿萃取3次,合并氯仿液。氯仿液用40ml水洗滌,分取氯仿層,置水浴上蒸干。殘渣用氯仿溶解并定溶至2ml,作供試液。

      3.2薄層掃描條件硅膠G預制薄層板,展開劑為氯仿-甲醇(9∶1),上行展開后,取出,晾干,噴10%硫酸乙醇溶液,105℃烘3min,取出,在薄層板上覆蓋一同樣大小的潔凈玻璃板,四周用膠帶封牢,掃描測定。掃描條件:反射式雙波長鋸齒掃描,測定波長為λS=530nm,λR=420nm,狹縫0.4mm×0.4mm,SX=3。

      3.3線性范圍精密吸取上述齊墩果酸對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,按上述條件展開、顯色、掃描,得回歸方程Y=3565X-1779,r=0.9996,線性范圍內0.8~6.4μg。

      3.4精密度試驗精密吸取齊墩果酸對照品溶液2.0μl,共5份,分別點于同一硅膠G薄層板上,按上述條件展開、顯色、掃描,測得峰面積積分值的RSD=1.66%(n=5)。

      3.5穩定性試驗取對照品溶液點樣,按上述條件展開顯色后,在0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h,分別進行掃描測定,結果峰面積積分值的RSD為0.57%,顯示在3h內穩定。

      3.6重現性試驗精密稱取同一批號樣品5份,按3.7項下操作,測得樣品齊墩果酸的RSD=1.8%(n=5)。

      3.7樣品測定分別精密吸取藥材供試液2.0μl,對照品溶液1.0μl和3.0μl,交叉點于同一硅膠G薄層板上,按上述條件展開、顯色、掃描測定,以外標二點法計算含量。結果見表1。

      3.8回收試驗按加樣回收法制備試樣并按3.7項下操作,結果回收率為98.7%,RSD為19.5%(n=5)。

      表1幾批白花蛇舌草的齊墩果酸含量(略)

      4討論

      白花蛇舌草與上述幾種偽品其藥材外觀極相似,引起產地錯收錯銷,應予糾正。其次我省部分地區歷來就有將水線草與白花蛇舌草相互混用習慣,經查資料表明,白花蛇舌草主含齊墩果酸、熊果酸等,水線草主含東葉草苷、雞屎藤次苷。筆者認為水線草不能作白花蛇舌草藥用。

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